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細(xì)胞在液氮罐中的保存步驟 58

點擊次數(shù):2015 更新時間:2020-04-02

怎么在液氮罐里儲存細(xì)胞呢?凍存細(xì)胞的步驟會影響到細(xì)胞復(fù)蘇時的活力,所以在使用液氮罐儲存細(xì)胞時應(yīng)小心并按步驟操作:MVE液氮罐

1、預(yù)先配制凍存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存預(yù)冷;

2、用胰酶對細(xì)胞進行消化:倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,PBS沖洗兩次,用胰酶消化細(xì)胞(盡可能溫和);

3、再次用*培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,將預(yù)冷的凍存液加入消化*的細(xì)胞中,用滴管輕輕吹打混勻。

4、在每支凍存管中加入1ml細(xì)胞液,密封后標(biāo)記凍存細(xì)胞名稱和凍存日期。

5、凍存步驟的細(xì)致直接關(guān)系到細(xì)胞復(fù)蘇時的活力,如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐**;或者可以在4℃;MVE液氮罐

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